IGF1活性蛋白的促細(xì)胞增殖作用
胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF1),又稱(chēng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)素C,是一種在分子結(jié)構(gòu)上類(lèi)似于胰島素但其促生長(zhǎng)活性更強(qiáng)于胰島素的低分子肽。
據(jù)報(bào)道,IGF1能誘導(dǎo)多種細(xì)胞的增殖、遷移和分化,其中包括人乳腺癌細(xì)胞系MCF7。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察IGF1活性蛋白對(duì)MCF7細(xì)胞系的促增殖作用來(lái)評(píng)估IGF1蛋白的活性。
實(shí)驗(yàn)方案:
1. 將MCF-7細(xì)胞接種到96孔板中,接種3復(fù)孔,調(diào)整每孔細(xì)胞數(shù)2000個(gè),培養(yǎng)過(guò)夜待細(xì)胞貼壁;
2. 更換為無(wú)血清的DMEM培養(yǎng)基,并加入不同濃度的IGF1蛋白,培養(yǎng)72小時(shí);
3. 在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞增殖的情況,并用CCK-8試劑盒進(jìn)行細(xì)胞增殖的檢測(cè)(每孔加入10微升CCK-8溶液,加入CCK8后,避光37℃孵育1-4小時(shí)后,酶標(biāo)儀檢測(cè)波長(zhǎng)為OD450 nm處吸光度值)
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
圖 1. IGF1蛋白刺激MCF-7細(xì)胞的增殖
A. MCF-7細(xì)胞以10ng/ml IGF1蛋白刺激72小時(shí)后;
B. MCF-7細(xì)胞未加刺激。
圖 2. IGF1蛋白對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖的劑量效應(yīng)曲線
實(shí)驗(yàn)結(jié)論:
云克隆IGF1活性蛋白可明顯刺激MCF-7細(xì)胞的增殖。
參考信息:
云克隆IGF1活性蛋白貨號(hào):APA050Hu61