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云克隆TGFb1活性蛋白

TGFb1是TGF-beta家族中,所占比例最高,活性最強的一種多功能細(xì)胞活性調(diào)節(jié)因子。能夠執(zhí)行許多細(xì)胞功能,包括控制細(xì)胞生長,細(xì)胞增殖,細(xì)胞分化和凋亡。

蛋白活性驗證

為了測試TGFb1對細(xì)胞凋亡的影響。以每孔5000個細(xì)胞的密度將A549細(xì)胞接種到含有不同濃度的重組人TGF-b1蛋白的1%血清標(biāo)準(zhǔn)DMEM的96孔板中。倒置顯微鏡下觀察TGFb1作用48h后A549細(xì)胞增殖情況,如圖1所示。

重組人TGF-b1孵育48h后,采用CCK-8法檢測細(xì)胞活力。結(jié)果如圖2所示。TGFb1明顯抑制A549細(xì)胞活力。(ED50=6.7ug/ml)

TGFb1已被證實可與TGFb受體1、Decorin、LTBP1等結(jié)合。因此,我們采用ELISA法檢測重組人TGF-b1與重組人LTBP1的交互作用。