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組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)活性蛋白

組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)是基質金屬蛋白酶(MMP)家族的重要抑制因子,屬于TIMP蛋白家族成員之一。TIMP2通過特異性結合MMP(尤其是MMP2和MMP9)的活性位點,抑制其蛋白水解活性,從而調控細胞外基質(ECM)的降解與重塑,在組織修復、炎癥反應和腫瘤轉移等生理病理過程中發(fā)揮關鍵作用。除抑制MMP外,TIMP2還可作為多功能蛋白參與細胞信號調控。例如,它通過激活整合素和生長因子受體(如IGF1R)影響細胞增殖、分化及凋亡。研究表明,TIMP2在多種癌癥中表達異常,可能作為抑癌因子或促癌因子發(fā)揮作用,其雙重角色取決于微環(huán)境上下文。此外,TIMP2還被發(fā)現(xiàn)與阿爾茨海默病等神經(jīng)退行性疾病相關,可能通過調節(jié)β-淀粉樣蛋白沉積影響病程。因其在ECM穩(wěn)態(tài)和疾病中的核心地位,TIMP2已成為潛在的診斷標志物和治療靶點,尤其在抗腫瘤和抗纖維化領域備受關注。


○ 產(chǎn)品貨號:APA128Ga01 

○ 活性驗證
TIMP2是一種分子量為22 kDa的非N-糖基化蛋白,可由多種細胞類型分泌,通過形成非共價二元復合物抑制MMPs活性。除抑制功能外,TIMP2還具有促紅細胞生成和細胞生長促進作用。本實驗通過熒光肽底物MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH2(檢測緩沖液:50 mM Tris、10 mM CaCl2、150 mM NaCl、0.05% Brij-35,pH 7.5)評估重組雞源TIMP2(rgTIMP2,分子量23 kDa)對重組人源MMP2(rhMMP2)的抑制活性。具體步驟為:將100 μg/mL rhMMP2經(jīng)1 mM APMA于37℃活化1小時后,與系列濃度rgTIMP2(8 μL)及檢測緩沖液(59.2 μL)混合(對照組僅含緩沖液與rhMMP2),37℃孵育2小時。取50 μL五倍稀釋反應液加入微孔板,加入50 μL 20 μM底物啟動反應(空白對照為50 μL緩沖液+50 μL底物),在320 nm激發(fā)波長/405 nm發(fā)射波長下進行5分鐘動力學檢測。如圖1所示,rgTIMP2可顯著抑制rhMMP2活性,其半數(shù)抑制濃度(IC50)小于16 nM。

○ 結果展示