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組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)活性蛋白

組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)是基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑(TIMPs)家族的重要成員,能夠特異性抑制基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)的活性,從而調(diào)控細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的降解與重塑。TIMP4在心臟、腦、卵巢等組織中高表達(dá),具有抑制腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移、調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)及維持組織穩(wěn)態(tài)等功能。研究表明,TIMP4通過抑制MMPs(如MMP-2、MMP-9)的蛋白水解活性,影響腫瘤微環(huán)境,抑制癌細(xì)胞的侵襲和血管生成。在心血管疾病中,TIMP4可減輕心肌纖維化,改善心臟功能。此外,TIMP4在神經(jīng)系統(tǒng)疾病(如阿爾茨海默?。┲锌赡芡ㄟ^減少異常ECM降解發(fā)揮保護(hù)作用。然而,TIMP4的作用具有組織特異性,在某些癌癥(如乳腺癌、前列腺癌)中可能呈現(xiàn)促腫瘤或抑腫瘤的雙重作用,具體機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。TIMP4作為MMPs的關(guān)鍵調(diào)控因子,在疾病診斷和治療中具有潛在應(yīng)用價值。


○ 產(chǎn)品貨號:APA130Mu01 

○ 活性驗(yàn)證
通過熒光肽底物MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH2的酶切實(shí)驗(yàn),我們檢測了重組小鼠TIMP4(分子量22.55kDa)對重組人MMP2(rhMMP2)活性的抑制效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)體系采用50mM Tris、10mM CaCl2、150mM NaCl、0.05%Brij-35(pH7.5)的緩沖系統(tǒng)。將100μg/mL的rhMMP2經(jīng)1mM APMA于37℃活化1小時后,與系列稀釋的rmTIMP4溶液(8μL)及緩沖液(59.2μL)混合反應(yīng)2小時。取50μL五倍稀釋的反應(yīng)液與20μM底物等體積混合啟動反應(yīng),以320nm/405nm的激發(fā)/發(fā)射波長進(jìn)行5分鐘動力學(xué)檢測。如圖1所示,重組小鼠TIMP4能顯著抑制rhMMP2的蛋白水解活性,其半數(shù)抑制濃度IC50<0.75nM,展現(xiàn)出強(qiáng)效的MMP2抑制能力。該結(jié)果證實(shí)TIMP4通過直接結(jié)合MMP2發(fā)揮其生理調(diào)控功能。

○ 結(jié)果展示