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干擾素β(IFNb)活性蛋白

干擾素β(IFN-β)是一種由細(xì)胞天然產(chǎn)生的細(xì)胞因子,屬于I型干擾素家族(包括IFN-α、IFN-β等),主要通過激活免疫調(diào)節(jié)和抗病毒反應(yīng)發(fā)揮作用。它由成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞和免疫細(xì)胞(如樹突狀細(xì)胞)在病毒感染或炎癥刺激下分泌,通過結(jié)合細(xì)胞表面的I型干擾素受體(IFNAR),觸發(fā)JAK-STAT信號通路,誘導(dǎo)數(shù)百種干擾素刺激基因(ISGs)的表達(dá),從而抑制病毒復(fù)制、增強(qiáng)抗原呈遞并調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答。IFN-β是多發(fā)性硬化(MS)的一線治療藥物(如IFN-β1a和IFN-β1b),通過抑制T細(xì)胞活化、減少血腦屏障破壞和下調(diào)促炎細(xì)胞因子(如TNF-α)來緩解復(fù)發(fā)緩解型MS的發(fā)作。此外,它也被研究用于某些病毒感染(如乙肝、丙肝)和腫瘤輔助治療,但因副作用(流感樣癥狀、抑郁、肝毒性等)限制其廣泛應(yīng)用。近年來,聚乙二醇化IFN-β(長效制劑)和聯(lián)合療法(如與免疫檢查點(diǎn)抑制劑)正在探索中,以優(yōu)化療效和耐受性。其抗纖維化和抗腫瘤潛力也備受關(guān)注。

○ 產(chǎn)品貨號:APA222Po02

○ 活性驗證
為研究IFN-β對細(xì)胞凋亡的影響,實驗采用A549細(xì)胞進(jìn)行檢測:將細(xì)胞以5×103個/孔的密度接種于96孔板(設(shè)三個復(fù)孔),待細(xì)胞貼壁后更換為無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)過夜,隨后換用含5%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,并加入不同濃度的重組豬IFN-β。培養(yǎng)48小時后,通過倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),并采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法檢測細(xì)胞增殖活性。具體操作如下:每孔加入10μL CCK-8溶液,37℃孵育1-4小時后,使用酶標(biāo)儀測定450nm處的吸光值。圖1顯示經(jīng)IFN-β處理48小時后,倒置顯微鏡下觀察到的A549細(xì)胞凋亡情況;圖2為CCK-8法檢測結(jié)果顯示,IFN-β能顯著抑制A549細(xì)胞活力,測得重組豬IFN-β的半數(shù)有效濃度(ED50)為4.9μg/mL。

○ 結(jié)果展示

Figure 1. Cell apoptosis of A549 cells after stimulated with IFNb.

(A)A549 cells cultured in DMEM, stimulated with 10ug/ml IFNb for 48h; 

(B)Unstimulated A549 cells cultured in DMEM for 48h.

 Figure 2. Cell apoptosis of A549 cells after stimulated with IFNb.